Gaosiga ma fa'amatalaga fa'akemikolo o le oyster mushroom laccase NRC 620 ma le iloiloga o lona aoga i le fa'amaninoina o le sua o le apu.

A maeʻa aso e 25 o le faʻasusuina tumau i le 28°C, o le laccase mai le *Pleurotus ostreatus* NRC620 na faʻaalia ai le gaioiga aupito maualuga i le vailaʻau faʻatoʻaga fungal. O le pH sili ona lelei ma le vevela mo lenei enzyme o le 3.0 ma le 70°C, i le faasologa. A maeʻa itula e 2 o le faʻasusuina i le 40°C ma le 50°C, na taofia ai le gaioiga o le enzyme i le 68.33% ma le 59.61%, i le faasologa. A maeʻa itula e 2 o le faʻasusuina i le citrate-phosphate buffer (pH 7.0), na tumau pea le gaioiga o le enzyme i le 100%. O le faʻaopoopoina o le 10 mM MgSO₄ ma le CuSO₄ na faʻateleina ai le gaioiga o le enzyme i le tusa ma le 21% ma le 35%, i le faasologa, aʻo NaCl, MnCl₂, KCl, ma CaCl₂ na taofia ai le gaioiga o le enzyme. I le fa'aaogaina o le ABTS o se substrate, o le kinetic parameters (Km ma le Vmax) o le *Pleurotus ostreatus* NRC 620 laccase e 1.99 mM ma le 16,217 μmol min−1 L−1, i le faasologa lava lea. O le togafitiga fa'aenzymatic o fa'ata'ita'iga o le sua o le apu na fa'aitiitia ai le pH ma le viscosity, ma o lenei fa'aitiitia e feso'ota'i ma le fa'ateleina o le taimi e teu ai. O le togafitiga Laccase na mafua ai ona fa'aitiitia teisi le aofa'i o le phenolic o le sua o le apu, ae leai se fa'aitiitia o le antioxidant activity na matauina.
I tausaga talu ai nei, ua taulaʻi atu ai saienitisi i le faʻaaogaina o le biotechnology lanumeamata i le alamanuia o meaʻai. O le Laccase o se tasi o enzymes sili ona aoga i le alamanuia o meaʻai, e maua ai faʻaoga i vaega e pei o le faʻagasologaina o le sua, taoina o meaʻai, faʻamautuina o le uaina, ma le faʻaleleia atili o uiga lelei o meaʻai.¹E tele la'au maualuluga ma meaola ninii e fa'asa'olotoina le laccase,²ma o siama e pei o deuteromycetes, ascomycetes, ma basidiomycetes e mafai fo'i ona gaosia le laccase.³O le Laccase (EC 1.10.3.2) o se oxidase lanumoana e fa'aitiitia ai le okesene molecular i le vai e fa'aaoga ai se faiga e aofia ai atomu kopa eseese e tolu, ma fa'apea ona fa'a'oksizenina ai le tele o vaila'au phenolic ma amines manogi. I le taimi o le gaosiga o sua o fuala'au 'aina ma fuala'au faisua, o le enaena enzymatic ma le nonenzymatic o ni mataupu taua.⁴Talu ai o nei vailaʻau e aʻafia ai le lanu, tofo, ma le manogi o le sua, e tatau ona aveese.⁵
O fuala'au 'aina uma, o apu e sili ona 'aina i le lalolagi atoa ma le Iuni a Europa. I le 2019, na tulaga tolu ai le gaosiga o apu i le lalolagi atoa, e sili atu i le 87 miliona tone.⁶E tele vailaʻau phenolic o loʻo iai i apu, e aofia ai flavonoids ma phenolic acids e pei o le caffeic acid ma le chlorogenic acid.⁷Ona e masani ona 'ai le sua o le apu i lona tulaga manino, e tusa ma le 50% i le 90% o vaega phenolic e leiloa i le taimi o le faiga o le faamamaina.⁸O aso nei, e masani ona filifilia e tagata faʻatau oloa e le tele ni auga o le gaosiga, e pei o le sua o le apu ua pogisa ma e tele ai le polyphenol. Peitaʻi, ona o le tele o le phenolic o loʻo iai, o lenei ituaiga sua o le apu e faigofie ona suia lona lanu ma pogisa.⁹E tele tekinolosi e faʻaaogaina, e aofia ai auala e togafitia ai i le vevela e pei o le pasteurization i le 60–90°C, e faʻaitiitia pe puipuia ai le pogisa o le sua o le apu.¹⁰Ae ui i lea, e tusa ai ma suʻesuʻega a Sauceda-Gálvez¹¹, e mafai e le fa'agasologa fa'avevela ona fa'aumatia vaila'au fe'avea'i ma a'afia ai uiga lelei o le sua o le apu. O isi auala e sui ai metotia fa'avevela e aofia ai le supercritical carbon dioxide, ultraviolet radiation, ultrasound, high hydrostatic pressure, po'o le high-pressure homogenization.¹²O le lelei o nei tekinolosi ma le maua mai o sua fuala'au talafeagai e fa'alagolago i fa'atulagaga e fa'aaogaina ma uiga o oloa. O lo latou fa'aaogaina lautele e fa'atapula'aina e tau maualuga, a'afiaga leaga i le lelei o nisi oloa taumafa, po'o le le lava o le fa'agataina o enzyme.^13,14
E mafai ona fa'aaoga le Laccase e fa'amautu ma fa'amanino ai le sua o fuala'au.¹⁵Gökmen ma isi.¹⁶fautuaina le faʻaaogaina o le laccase mo le faʻamalamalamaga o le sua o fualaʻau auā e aveese lelei ai phenolic compounds e ala i le liua i polymers poʻo oligomers e faigofie ona aveese e soʻo se ultrafiltration membrane, ma mafai ai e le sua o le apu ona faatumauina le lanu mautu ma le manino mo le ono vaiaso i le 50°C. O le *Trichoderma* laccase ua faʻamamāina sa faʻamauina i luga o alumina beads ma faʻaaoga e aveese ai ni mea e le manaia le tofo e mafua mai i le faʻaleagaina o siama i le sua o le apu.¹⁷
E tusa ma le 80-90% o vaega faigofie ona feliua'i o le sua o le apu o esters ma aldehydes, ia e maua ai se manogi tulaga ese i le sua.¹⁸Sa fa'amauina le Laccase mai le *Trametes versicolor* i luga o se lagolago taugofie na faia mai le alava masani mai atigi popo mo le fa'amalamalamaga o le sua o le apu.¹⁹O suʻesuʻega na faia muamua na suʻesuʻeina ai le faʻamautu o le sua o le apu (lanu ma le pala) e faʻaaoga ai metotia e leai ni enzyme poʻo le faʻamautuina, pe faʻatasi ai ma le ultrafiltration.^5,19Peita'i, e le o manino lava le a'afiaga o fungal laccases i meatotino fa'aletino ma kemikolo o le sua o le apu i le taimi o le teuina. O le mea lea, o le fa'amoemoega o lenei su'esu'ega o le su'esu'eina lea o suiga i meatotino fa'aletino ma kemikolo, le aofa'i o le phenolic compound, ma le antioxidant activity o le sua o le apu pe a uma ona togafitia i fungal laccases ma le teuina i totonu o le pusaaisa mo le lua vaiaso. E iai le gafatia o Laccases e fa'a'oxygen ai phenolic compounds, lea e avea ai ma mea e folafola atu ai le fa'aaogaina i faiga fa'apisinisi eseese, e aofia ai le fa'amalamalamaina o le sua. O lenei su'esu'ega na su'esu'eina ai laccases mai le *Pleurotus ostreatus* NRC 620, ma taula'i i tulaga lelei mo a latou gaioiga ma le aoga i le fa'amalamalamaina o le sua. E ui o su'esu'ega i luga o oyster mushrooms (P. ostreatus NRC 620) e le'i atoatoa, o su'esu'ega na faia muamua na su'esu'eina ai enzymes mai punaoa eseese o fungal, e pei o Trametes versicolor ma Ganoderma lucidum. O le fa'amoemoega o lenei su'esu'ega o le iloiloina lea o le ono fa'aaogaina o lenei enzyme i le pisinisi o mea'ai ma fa'amamafa ona uiga tulaga ese, aemaise lava lona pH ma le vevela lelei.
Sa fa'atauina mai le 2,2′-Azooxybis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) mai Sigma-Aldrich (Kanata). O isi reagents uma sa i ai le tulaga fa'ata'ita'i.
Na maua e le Nofoaga Autu mo le Aoina o Meaola Fa'aolaola o le Microbial Culture le ituaiga o mushroom oyster ua lauiloa o le NRC620. A mae'a ona totoina fa'asolosolo, ona teuina lea o lenei ituaiga i luga o le agar dextrose pateta i le 4°C. O le auala e saunia ai le inoculum e fa'apea: O le mycelium e 10 aso le matua, ua atoatoa ona tuputupu a'e, na totoina i luga o ipu agar dextrose pateta ma fa'asusu i le 28°C. A mae'a aso e 10, e tolu poloka mycelial e 12-mm le lautele na aveeseina mai le agar media e fa'aaoga ai se punch u'amea mama ma tu'u i totonu o fagu Erlenmeyer e 250-mL ma ni plug cotton o lo'o i ai le 50 mL o le medium culture ua fa'amamaina (pH 5.0, e pei ona fa'amatalaina muamua e Othman et al.²⁰). Sa fa'asusuina ia fa'ato'aga i le 28°C mo le 18 aso. Ona fa'amamā lea o ia fa'ato'aga i le pepa fa'amamā Whatman No. 1, ma o le supernatant na maua mai sa avea ma puna o le enzyme.
Sa fuafuaina le gaioiga o le Laccase e faʻaaoga ai le ABTS o se substrate. O le paluga tali (2 mL) sa i ai le 500 μL o le 0.3 mM ABTS (faʻasusu i le 0.1 M sodium citrate buffer, pH 4.5) ma le aofaʻi manaʻomia o le faʻataʻitaʻiga o le enzyme ua faʻasusuina i le vai faʻamamā.^21,22I le mafaufauina e mafai e le laccase ona fa'a'okesaine le ABTS i le vevela o le potu (28 °C ± 2), na fuafuaina le fa'a'okesaine o le ABTS e ala i le fuaina o le fa'ateleina o le absorbance i le 420 nm (ε).₄₂₀= 36,000 senitimita^-1 M ^-1) fa'aaoga le Agilent Carry-100 UV spectrophotometer. E tasi le iunite o le gaioiga laccase e mana'omia e fa'a-oxidize ai le 1 μmol ABTS i le minute. Sa fuafuaina le maualuga o le porotini e ala i le metotia a Bradford e fa'aaoga ai le bovine serum albumin e fai ma fa'atonutonuga i totonu.^23,24
Ina ua maeʻa ona maua le enzyme mai le ituaiga o pulouaitu oyster NRC 620, sa fuaina lona gaioiga i vaitaimi eseese o le totoina mo le 25 aso i lalo o tulaga tumau i le 28 °C.
Ina ia suʻesuʻeina le aafiaga o le vevela i le gaioiga a le laccase, na faia ai ni faʻataʻitaʻiga i le va o le vevela mai le 20 i le 90 °C. Aʻo leʻi faʻaopoopoina le enzyme ma amata le tali atu, na faʻafefiloi le buffer (0.1 M sodium citrate, pH 4.5) ma le substrate (ABTS) ma faʻasusu mo le 5 minute i vevela eseese. Na iloiloina le mautu o le vevela o le enzyme e ala i le faʻasusu i le 0.05 M sodium phosphate buffer (pH 7.0) i le 40, 50, 60, ma le 70 °C mo le 2 itula, i le faasologa. Ona iloiloina lea o gaioiga o totoe e faʻaaoga ai le substrate ABTS.
Sa iloiloina le aafiaga o le pH i le gaioiga o le laccase e faʻaaoga ai le ABTS o se substrate i totonu o le 0.1 M citrate-phosphate buffers ma le pH range mai le 2.5 i le 7.0. Sa fa'a'afu le vaila'au enzyme i le 40°C mo le lua itula i totonu o le 0.1 M citrate ma le Tris buffers (pH 3, 4, 6, ma le 7) e iloilo ai le mautu o le pH. Sa fuafuaina le gaioiga o totoe ma le ABTS o se substrate ina ua mae'a le fa'a'afu.
Sa fa'a'aisa le laccase mo le 10 minute i totonu o le sodium phosphate buffer (0.05 M, pH 7.0) o lo'o i ai ni ions u'amea eseese (Mg2+, Cu2+, Co2+, Ca2+, Zn2+, K+, Na+, ma le Mn2+) i le maualuga o le 2.5 mM ma le 10 mM, i le faasologa. Ona fa'aopoopo lea o le substrate (ABTS) e amata ai le tali atu, ma iloiloina ai le gaioiga fa'atatau.
O le fa'a'okesa'iina o le ABTS e ala i le laccase i le tele o tulaga (0.025–3 mM) na fuaina i le pH 4.5 e iloa ai le kinetic parameters (Vmax ma le Km). O le kinetic^{mea tumau}o le fua fa'atatau a Michaelis-Menten na fuafuaina e fa'aaoga ai le Lineweaver-Burk plot, lea e fa'aalia ai le fesuia'iga o le fua fa'atatau o le tali atu e fai ma galuega tauave o le fa'aputuga o le substrate. O le kinetic constants na fuafuaina mai le Lineweaver-Burk plot e fa'aaoga ai le polokalama GraphPad Prism version 6.01.
A uma ona fufuluina lelei apu i le vai paipa, ona vaeluaina lea ma fa'amamāina le sua e fa'aaoga ai se masini fa'amamā apu Braun MP80 (gaosia i Siamani). Na fa'amamāina le sua i ni vaega e fa o le ie sisi. E leai ni enzymes na fa'aopoopoina i le vaega fa'atonutonu, a'o le 2.0% laccase (le malosi sili ona aoga na fa'ata'ita'iina) na fa'aopoopoina i le sua apu fou saunia, lea na teuina i le 4°C mo le lua vaiaso.
Sa fuafuaina le acidity titratable (TA) ma le pH e tusa ai ma le metotia a Boulton et al.^al.27. O le pH o faʻataʻitaʻiga taʻitasi sa fuaina e faʻaaoga ai se mita pH numera (JENWAY 3510 pH meter). O le Titratable acidity (TA) sa fuafuaina e faʻavae i luga o le malic acid e faʻaaoga ai le fua faʻatatau lenei.
O le V ma le C o le voluma (mL) ma le malosi (0.1 mol/L) o le vailaʻau sodium hydroxide na faʻaaogaina i le titration. O le K o le malic acid conversion coefficient, e tutusa ma le 0.067, ma le W o le mamafa (g) o le sua o le apu.
O le aofaʻi atoa o mea malo e mafai ona solo (^TDS) o le aofaʻi o faʻataʻitaʻiga sua uma na fuafuaina e faʻaaoga ai le PAL-1 pocket refractometer (ATAGO, Tokyo, Iapani). A maeʻa fua taʻitasi, ona fufulu lea o le tioata opitika i le vai deionized, ma faʻataʻitaʻiina faʻatolu faʻataʻitaʻiga sua apu taʻitasi. O le tau mo faʻataʻitaʻiga taʻitasi na fuafuaina e ala i le faʻatatauina o fua e tolu. O le averesi ± tulaga faʻataʻitaʻi mo faʻataʻitaʻiga sua apu taʻitasi na fuafuaina foʻi e ala i le faʻatatauina o nei taunuuga.
Sa iloiloina le viscoelasticity o faʻataʻitaʻiga o le sua o le apu e faʻaaoga ai se rotational viscometer (RV, Rheotest 2, Siamani). Sa tuʻu le faʻataʻitaʻiga i totonu o le cylinder “S2″ o le viscometer. O le apparent viscosity sa faʻatusalia e le slope o le shear stress versus shear rate curve, lea na fuafuaina mai le shear stress ma curves talafeagai i le shear rates eseese (mai le 1.00 i le 437.4 s⁻¹). O le fua faʻatatau mo le fuafuaina o le apparent viscosity e faʻapea:
O fea o le η o le viscosity foliga vaaia (cP), o le τ o le shear stress (dyn/cm²), o le γ o le shear rate (sec⁻¹), ma o le (τ) e fuafuaina e faʻaaoga ai le tau o le torque (α) ma le cylinder (Z) e faʻaaoga ai le fua faʻatatau lenei: τ = Z. α.
O le fa'asinomaga o le enaena na fuafuaina e tusa ai ma le metotia a Meidav ​​​​et^al.29. O se fa'ata'ita'iga o le sua e 10-ml na fa'a'au'au i le 2750 xg mo le 10 minute. E 5 ml o le sua na palu fa'atasi ma le 5 ml o le 95% ethanol. O le mitiia o le paluga na fuaina i le 420 nm e fa'aaoga ai le Shimadzu UV spectrophotometer (UV-1601 PC).
O le aofaʻi atoa o le phenolic content (TPC) sa fuafuaina i le lanu e faʻaaoga ai le Folin-Ciocalteu reagent e pei ona faʻamatalaina e Boulton et al.^[27]]. O se pi'oga masani o le gallic acid na fausia mo le maualuga mai le 0 i le 500 mg/L (^r²= 0.997). O lo'o fa'aalia i'uga o ni fua fa'atatau o le gallic acid (mg GAE/mL).
Fa'aopopo le 125 μL o le vai fa'amamā ma le 2850 μL o le vaila'au FRAP i le 25 μL o le sua o le apu ma tu'u le paluga i le pogisa mo se taimi.³⁰min. Ona fua lea o le absorbance i le 593 nm e faʻaaoga ai le Shimadzu UV spectrophotometer (UV-1601 PC). Sa saunia le FRAP reagent e ala i le palu faatasi o le 300 mM acetate buffer (pH 3.6), 20 mM iron(III) chloride, ma le 10 mM 2,4,6-tris(2-pyridyl)triazine (TPTZ) (ua faʻamamāina i le 40 mM HCl) i le fua faatatau o le 10:1:1. Sa faia se piʻo masani e faʻaaoga ai le Trolox o le masani (^R²= 0.999), ma o lo'o fa'aalia taunuuga o le μM Trolox/mL.
Na fuafuaina le malosi fa'a-antioxidant o sua ua togafitia ma sua e le'i togafitia e fa'aaoga ai le metotia DPPH e iloilo ai lo latou gafatia e fa'aumatia ai radicals saoloto a le DPPH.³¹E sefulu microliters o le sua na palu faatasi ma le 1 ml o le DPPH solution (100 μM) i le methanol. A maeʻa ona faʻagasolo i le pogisa mo le 30 minute, ona fuaina lea o le mitiia o le paluga i le 517 nm e faʻaaoga ai le Shimadzu UV spectrophotometer (UV-1601 PC). O iʻuga na faʻaalia o ni trolox equivalents (μM trolox/ml) e faʻavae i luga o se calibration curve (_^R2= 0.990).
O faʻamaumauga na maua na faʻaalia ai o le gaosiga maualuga o le laccase na matauina i pulouaitu oyster NRC 620 i le faaiuga o le aso lona 18 o le faʻafefeteina, ma oʻo atu ai i le gaioiga o le 1302 U/L. O le mea lea na avea ma faʻavae mo le fuafuaina o le taimi sili ona lelei mo le gaosiga o le laccase (Ata 1). E ui ina faʻateleina le gaosiga o le enzyme i le faʻateleina o le taimi o le totoina, ae o le fua faatatau o le faʻateleina e leʻi faʻatusatusa saʻo i le taimi o le totoina; ina ua mavae aso e 21, na faʻateleina le gaioiga o le enzyme i le naʻo le 90 U/L (i le 1390 U/L). O le mea lea, o aso e 18 na filifilia mulimuli ane o le taimi sili ona lelei mo le totoina e paleni ai le fua o oloa ma faʻamanuiaga tau tamaoaiga o le faʻateleina o le taimi o le totoina.
Aafiaga o le taimi e totoina ai i le fua o le laccase i le Pleurotus ostreatus NRC 620. E tolu (12 mm) poloka mycelial fungal na fa'asusuina i totonu o le 50 ml o le vaila'au mama ma fa'asusuina i le 28 °C mo taimi eseese.
E tusa ai ma isi suʻesuʻega, o a matou taunuuga e faʻaalia ai o le vaitaimi sili ona lelei mo le totoina o siama e ausia ai le maualuga o le laccase secretion e fungi e foliga mai o le va o le 7 ma le 36 aso.³²E tusa ai ma le saunoaga a Ezike ma isi.³³, *Trametes polyzona* WRF03 na maua ai le aofaʻi aupito maualuga o le laccase i le faʻaiʻuga o le aso iva o le faʻafefeteina, faʻatasi ai ma se gaioiga faʻapitoa o le 1637 U/mg porotini. E le gata i lea, Othman et al.³⁴na maua ai o le *Trichoderma harzianum* S7113 na fa'asa'olotoina se aofa'iga tele o le laccase i le aso lima o le totoina. O le fua faatatau o le gaosiga o le laccase na o'o atu i le tumutumuga o le gaioiga i le aso sefulufa ona faasolosolo malie lea ona fa'aitiitia.³⁴E ui e mafai foi ona tupu le fa'asa'olotoina o le enzyme i le taimi autu o le tuputupu a'e, ae masani ona sili ona maualuga i le taimi o le vaeluaga ma e mafua mai i le fa'aaogaina o le puna o le kaponi po'o le naitorosene.^34,35
E ui lava ina faaalia e le laccase mai le Pleurotus ostreatus NRC 620 le gaioiga maualuga i luga o le tele o le vevela mai le 50°C i le 80°C, ma latalata i le tumutumuga o le gaioiga (69–98%), ae o lona maualuga o le gaioiga na matauina i le 70°C (Ata 2a). I tua atu o lenei vaega o le vevela, na faaitiitia le gaioiga o le enzyme i le tusa ma le 70°C. O nei taunuuga e faailoa mai ai o loo galue le enzyme i le maualuga o le vevela, atonu ona o le maualuga o le vevela e faateleina ai le malosi o le gaioiga o le tali atu.
A'afiaga o le vevela o le tali (a) ma le pH (b) i le gaioiga o le laccase i le *Pleurotus ostreatus* NRC 620. O le vevela mai le 20 i le 90 °C na ausia e ala i le fa'asusuina muamua o le paluga i vevela eseese mo le 5 minute a'o le'i fa'aopoopoina le enzyme ma amata le gaioiga. O le a'afiaga o le pH i le gaioiga o le laccase na iloiloina e fa'aaoga ai le ABTS o se substrate i fofo o lo'o i ai le 0.1 M citrate-phosphate buffer i luga o le pH e 2.5 i le 7.0.
E tusa ai ma Ezike ma isi^al.33, o le vevela sili ona lelei mo le *Trametes polyzona* WRF03 laccase e 55 °C, e tutusa ma le vevela mo le *Ganoderma lucidum*^laccase36ma e tutusa ma le vevela sili ona lelei (50 °C) mo le *Trametes polyzona* KU-RNW02737^laccase . ^Baldrian38ua matauina ai, e pei o isi faiga o enzyme e faʻaleagaina ai le lignin, o le vevela lelei mo le laccase e i le va o le 50 ma le 70 °C.
O faʻaiʻuga na faʻaalia ai o le enzyme na faʻaalia le gaioiga aupito maualuga i le pH 3.0, e oʻo atu i le 94% gaioiga i le pH 3.5. Peitaʻi, na tumau pea lona gaioiga i se vaega lautele o le pH mai le 2.5 i le 7.0 (Ata 2b). E le gata i lea, na faʻaalia ai le gaioiga maualuga i tulaga oona pe a faʻatusatusa i tulaga neutral poʻo alkaline. Na tumau pea lona gaioiga i le itiiti ifo i le 77% i luga o le vaega o le pH mai le 2.5 i le 4.5, ae na o le tusa ma le 38% i le pH 7.0. O le pH sili ona lelei mo le laccase mai le *Trametes polyzona* WRF03 o le 4.533, lea e tutusa ma le pH mo laccases mai le *Trametes polyzona* KU-RNW02737, *Trichoderma harzanium* 39, *Pleurotus* sp. 40, ma le *Trametes hirsuta* 41. Peitaʻi, e tusa ai ma le suʻesuʻega a Chairin et al.⁴², o le pH sili ona lelei mo le laccase mai le *Polymorpha f. sp.* WR710-1 e 2.2, ae o le pH sili ona lelei mo le laccase mai le *Polymorpha f. sp.* IBL-04 e 5.043. O le fusifusia o anions hydroxide (laccase inhibitor) i atoms copper o le T2/T3 laccase atonu o le mafuaaga lea o le faaitiitia o le gaioiga o le laccase i lalo o tulaga pH neutral po o alkaline. Atonu e faalavelaveina ai le fesiitaiga o eletise i totonu mai le ogatotonu T1 i le ogatotonu T2/T3, o lea^{fa'atapula'aina}le gaioiga o le enzyme23,44
I le fa'asusuina o le enzyme i vevela eseese, na iloa ai o le taimi fa'asusu ma le vevela na a'afia ai le mautu o le enzyme. E maitauina, o le laccase mai le *Trametes polyzona* NRC 620 na fa'aalia ai le mautu maualuga i le 40℃ ma le 50℃, ma taofia ai le 68.33% ma le 59.61% o lana gaioiga muamua, i le fa'asologa, ina ua mavae le 120 minute (Ata 3a). I se fa'atusatusaga, i lalo o tulaga tutusa (40℃ ma le 50℃, 120 minute), o le laccase mai le *Trametes polyzona* WRF03 na taofia ai le 64.38% ma le 42.92% o lana gaioiga, i le fa'asologa.³³I se isi itu, o le faʻateleina o le taimi e faʻasusu ai ma le vevela na faʻaitiitia ai le mautu o le *Trametes polyzona* NRC 620 laccase; A maeʻa ona faʻasusu i le 60℃ ma le 70℃ mo le 60 minute, na faʻaitiitia ai lona gaioiga i le 39.24% ma le 1.72%, i le faasologa (Ata 3a). E ogatusa ma taunuuga o faʻataʻitaʻiga, o le laccase mai le *Trametes polyzona* WRF03 na faʻaalia ai le mautu maualuga i le 40 ma le 50℃ i le faagasologa atoa o le togafitiga faʻavevela.³³E fa'apena fo'i, Lueangjaroenkit ma isi^al.37ma Chairin ma isi^al.42lipotia le mautu o laccases mai Trametes polyzona KURNW027 ma Trametes polyzona WR710-1 i le 50 °C mo le 1 itula, i le faasologa. I le avea ai o se biocatalyst aoga e mafai ona faaaogaina i vaega eseese o tekinolosi faabio, e tatau i le laccase ona i ai se mautu lelei ma le faatinoga i luga o se vaega lautele o le vevela.
O le mautu o le vevela (a) ma le mautu o le pH (b) o le laccase mai le *Pleurotus ostreatus* NRC 620. Sa iloiloina le mautu o le vevela e ala i le fa'apuna o le vaila'au enzyme i le 0.05 M sodium phosphate buffer (pH 7.0) i le 40, 50, 60, ma le 70 °C mo le 2 itula, i le faasologa. Sa iloiloina le mautu o le pH e ala i le fa'apuna o le vaila'au enzyme i le 0.1 M citrate buffer ma le Tris buffer (pH 3, 4, 6, ma le 7) i le 40 °C mo le 2 itula. O le gaioiga o totoe sa fuafuaina e fa'aaoga ai le ABTS o se substrate ina ua mae'a le fa'apuna.
Ina ia iloa tulaga sili ona lelei mo le faʻaaogaina ma le teuina o le enzyme, na matou suʻesuʻeina le aʻafiaga o le pH i le mautu o le laccase. O le faʻaalia i tulaga eseese o le pH na matua aʻafia ai le mautu o le fausaga o le porotini, ma faʻapea ona aʻafia ai le mautu ma le gaioiga o le mole mole o le enzyme. O taunuʻuga na faʻaalia ai e le mautu le enzyme i lalo o tulaga acidic, ae na faʻaalia ai le mautu sili atu i tulaga maualuga o le pH (vaega neutral ma alkaline). I tulaga pH o le 7.0, 6.0, 4.0, ma le 3.0, o le fua faatatau o le taofia o le enzyme pe a uma le 120 minute e tusa ma le 100%, 62.54%, 52.39%, ma le 11.14%, i le faasologa (Ata 3b). *Strombus multisus* WRF03 laccase na faʻaalia ai le mautu maualuga i tulaga neutral pH (5.5–6.5) ma le mautu maualalo i tulaga acidic pH (i lalo ifo o le 4.0). A maeʻa le 120 minute i le pH o le 5.5, 6.0, ma le 6.5, o le fua faatatau o le taofia o le enzyme e tusa ma le 82%, 100%, ma le 93%, i le faasologa lava lea.³³Khairin ma isi.⁴²na matauina o le laccase mai le Trametes polyzona WR710-1 sa mautu i le pH va o le 6.0 i le 7.0, ae o Sayed et al.⁴⁵na faʻaalia ai e sili atu le mautu o le laccase i lalo o tulaga pH e le soona malosi. Peitaʻi, o le laccase mai le Cerrena unicolor na faʻaalia foʻi le mautu i lalo o tulaga alkaline (pH 9.0)⁴⁶. O laccases na suʻesuʻeina na faʻaalia ai le maualuga o le mautu i se vaega lautele o le pH. Atonu o se uiga taua lea mo faʻaoga faʻapisinisi.
Talu ai o nisi o ion u'amea e iai aafiaga fa'aosofia ma fa'alavelave i le gaioiga o le enzyme, o latou aafiaga i le gaioiga o le enzyme e tatau ona mafaufau i ai i fa'aoga fa'apisinisi. E taua tele lenei mea aua o ion u'amea o mea fa'aleagaina masani ia o le siosiomaga e mafai ona a'afia ai le mautu ma le fa'aputuina o enzymes i fafo atu o le sela.⁴⁷Ina ia suʻesuʻeina aafiaga o le tele o ion uʻamea i luga o le laccase mai le *Pleurotus ostreatus* NRC 620, na matou faia ai ni faʻataʻitaʻiga talafeagai. E pei ona faʻaalia i le Ata 4, e fuafua i le ituaiga uʻamea na faʻaaogaina, o le faʻateleina o le maualuga o ion uʻamea mai le 2.5 mM i le 10 mM na aʻafia ai le galuega a le enzyme. Mo se faʻataʻitaʻiga,^Mg²⁺ , ^Co²⁺ , ^Zn²⁺, ma^Cu²⁺e mafai ona fa'aosofia ma fa'agaoioia le gaioiga o le enzyme, a'o^Na⁺ , ^Mn²⁺ , ^Ca²⁺, ma^K⁺e ono taofia ai le gaioiga o le enzyme. I le maualuga o le 10 mM, o Cu²⁺ ma Mg²⁺ ions o mea sili ia e fa'agaoioia ai le gaioiga o le laccase mai le *Pleurotus ostreatus* NRC 620, ma maua ai le tikeri o le fa'agaoioia e tusa ma le 34% ma le 20%, i le faasologa. Peita'i, i le maualuga o le 10 mM, o Ca²⁺ ions o mea sili ia e taofia ai le laccase, ma fa'aitiitia ai le gaioiga o le enzyme e tusa ma le 60%.
O le aafiaga o ions u'amea i le gaioiga a le Pleurotus ostreatus NRC 620 laccase. Na fa'a'ofuina le laccase mo le 10 minute i totonu o le sodium phosphate buffer (0.05 M, pH 7.0) o lo'o i ai ions u'amea eseese i le maualuga o le 2.5 mM ma le 10 mM. Ona amata lea o le tali atu i le fa'aopoopoina o le substrate (ABTS), ona fuaina lea o le gaioiga fa'atatau.
E ogatasi a matou taunuuga ma isi tusitala na maua ai o le Mg²⁺ ma le Cu²⁺ e faʻaleleia atili ai le gaioiga o le *Trametes polyzona* WRF03³. Na maua e Castaño et al.⁴⁸ o le laccase mai le *Xylaria* sp. e faʻaosofia i se tulaga e ala i ion kopa (Cu²⁺). E le gata i lea, na faia e Foroutanfar et al.⁴⁹ ma Si et al.⁵⁰ ni suʻesuʻega faapena i luga o laccases mai le *Paraconiothyrium variabile* ma le *Trametes pubescens*, i le faasologa lava lea. O le ituaiga II copper-binding site (T2) o lenei enzyme e mafai ona faʻatumuina i le Cu²⁺ i se tulaga tuʻuina atu, lea e ono faʻamatalaina ai le faʻaosofiaina o le gaioiga o le laccase i tulaga maualuga o le Cu²⁺³⁹. Talu ai o laccases o le white rot fungi o ni oxidases o loʻo i ai le tele o atomu kopa, o aʻafiaga o ions kopa i le gaioiga o le laccase e eseese ma e amata mai i le faʻaosofia ma le taofiofia i le le faaituau.⁵¹ I se faatusatusaga, o Zhou ma isi^{. [52]}lipotia mai^Cu²⁺taofia ai le gaioiga o le laccase a le anai i lalo o le eleele o Taiwan (Odontotermes formosanus). Peita'i, o laccases o Cerena sp. HYB07^[53]ma le Clitocybe maxima^[54]e le'i a'afia i ni ion kopa.
O le tulaga faapitoa o le substrate sa faatusalia e ona paramita kinetic (Km ma le Vmax); o le malosi o le sootaga o le substrate i le enzyme, o le maualalo foi lea o le tau o le Km ma o le maualuga foi lea o le tulaga faapitoa o le substrate.^3,21,55O fa'asologa o le kinetic (Km ma le Vmax) o le laccase mai le *Pleurotus ostreatus* NRC 620 na fuafuaina e fa'aaoga ai le polokalama GraphPad Prism 6.0 e ala i le fa'ata'ita'iina o le Lineweaver-Burk plot (Ata 5). A fa'aaoga le ABTS o se substrate, o taunuuga o le 1.99 mM ma le 16217 μmol.^{min⁻¹ L⁻¹,}i lea lava tulaga. Elsayed et al.²¹lipotia mai o tau o le Km mo le fa'a'okesaitaina o le ABTS e 0.1 mM ma le 0.064 mM, i le fa'asologa, o lo'o fa'aalia ai le maualuga o le vavalalata o Lac A ma Lac B isoenzymes mo ABTS. E le gata i lea, o tau o le Vmax e 0.182 μmol^min⁻¹ma le 0.603 μmol^min⁻¹, i le faasologa lava lea. O le tau o le Km na maua e maualalo ifo nai lo le Trametes polyzona WRF03 (8.66 mM); e le gata i lea, o lo latou tau Vmax (1429 mmol min⁻¹) sa faapena foi^maualalope a faʻaaogaina le ABTS o se substrate.33 I se tulaga tutusa, o tau Km o le Lentinus squarrosulus MR13 ma Trametes sp. AH28-2 laccase concentrations e 0.0714 mM ma le 0.025 mM, i le faasologa lava lea, ma o tau Vmax e 0.0091 mM min−1 ma le 0.67 mM min−1 mg−1 (e faatatau i le ABTS)^{, i le faasologa lava lea.56,57}
Sa suʻesuʻeina le aafiaga o le malosi o le ABTS i le gaioiga o le laccase mai le *Pleurotus ostreatus* NRC 620, ma sa faʻaalia ai se ata o le Lineweaver-Burk o le fesuiaʻiga o le saoasaoa muamua o le tali atu e faʻatusatusa i le malosi o le ABTS. Sa fuaina le tali atu o le oxidation o le ABTS ma ni eseesega o le malosi (0.025–3.0 mM) o le laccase i le pH 4.5 e iloa ai le kinetic parameters (Vmax ma le Km). Sa fuafuaina le Michaelis-Menten kinetic constants e faʻaaoga ai le ata o le Lineweaver-Burk o le fesuiaʻiga o le saoasaoa o le tali atu e faʻatusatusa i le malosi o le substrate. Sa fuafuaina le kinetic constants mai le ata o le Lineweaver-Burk e faʻaaoga ai le polokalama GraphPad Prism 6.01.
O enzymes fa'amanino masani, e pei o pectinases, e fa'a-hydrolyze mea pectic, e fa'aitiitia ai le viscosity ma le turbidity. Latou te fa'aleagaina lelei polysaccharides fa'atulagaina ma e masani ona fa'aaogaina fa'atasi ma isi enzymes, e pei o cellulases ma hemicellulases, e fa'aleleia atili ai le fua ma le manino. Peita'i, e le fa'atatauina fa'apitoa e pectinases ia phenolic compounds, o mea ia e mafua ai le turbidity ma le oxidative browning, aemaise lava i sua e pei o le sua o le apu ma le vine.⁵⁸I se faatusatusaga, o laccases e fa'atino ai le fa'aokseneina o vaila'au phenolic, ma fa'afefiloi ai i ni molela'au tetele e le mafai ona soloia e mafai ona aveese e ala i le sedimentation po'o le filtration. O lenei faiga e le gata ina fa'aleleia atili ai le manino ae fa'alauteleina ai fo'i le umi e teu ai le sua e ala i le fa'aitiitia o le ono mafai ona enaena oxidative e mafua mai i vaila'au phenolic. E le gata i lea, o faiga fa'amalamalama e fa'avae i luga o le laccase e mafai ona fa'atinoina i lalo o tulaga fa'agasologa mama (pH 3.5–5.5, vevela 25–40 °C), ma avea ai ma mea talafeagai mo sua ma'ale'ale e aunoa ma le fa'aleagaina o latou mea'ai po'o mea totino.⁵⁹Ua faʻaalia e suʻesuʻega e mafai e le togafitiga o le pectinase ona faʻamanino le sua i le 1–2 itula, ae o le togafitiga o le laccase e masani ona manaʻomia ai se taimi umi atu e tali atu ai (3–6 itula) e faʻaitiitia atoa ai vailaʻau phenolic. Peitaʻi, e mafai ona faʻaleleia atili lenei faiga e ala i le taofia o le enzyme poʻo le tuʻufaʻatasia o le laccase ma metotia faʻamanino faʻamekanika.⁶⁰I lenei suʻesuʻega, o le faʻavasegaina o le enzyme o le faʻaputuga mata na faʻaalia ai le tele o gaioiga o le laccase ma le α-amylase, ae o gaioiga o le pectinase ma le xylanase e matua maualalo lava, ma e leʻi iloa le gaioiga o le cellulase. O le mea lea, o le faʻaitiitia o le turbidity ma le aofaʻi o le phenolic e mafua tele lava i le gaioiga o le laccase, ae o le suiga o le viscosity e ono mafua ona o le gaioiga o le amylase.
O loʻo faʻaalia i le Laulau 1 faʻamatalaga faʻapitoa o le sua o le apu fou ma faʻataʻitaʻiga na togafitia i le laccase. O faʻaiʻuga na faʻaalia ai o le fua o le sua o le apu fou (71.59%) e maualalo ifo nai lo faʻataʻitaʻiga na togafitia i le laccase (87.34%). O nei faʻaiʻuga e ogatasi ma faʻaiʻuga a Pilnik ma Orange.⁶¹, o lē na faʻailoa mai o le faʻaaogaina o enzymes i le faʻagasologa o fualaʻau e mafai ona faʻateleina ai le fua o le sua, faʻaleleia atili ai le faʻamamāina, ma maua ai le sua manino ma lelei mo le faʻaputuina. O le faʻateleina o le fua o le sua e mafua ona o le faʻateleina o le aofaʻi o suka soluble i totonu o le sua. I le taimi o le hydrolysis enzymatic o fualaʻau, o le mesoglea ma le pectin i totonu o puipui o le sela o le oloa e faʻaumatia ma liua i ni mea soluble e pei o suka neutral ma acids.^62.O le tau o le pH o le sua o le apu na togafitia i le enzyme sa matua maualalo ifo nai lo le vaega pulea (P < 0.05), ma o le tau o le pH o vaega uma e lua na matua faateleina i le taimi o le teuina (Table 1). O nei taunuuga e ogatasi ma taunuuga a Mark et al.⁶³, o lē na matauina le faʻaitiitia o le pH o le sua o le fualaʻau cashew ina ua uma ona teuina pe a uma ona faʻavevela. O le faʻaleagaina o le pectin ma le faʻavaeina o le galacturonic acid pe a uma ona togafitia le enzyme atonu e mafua ai le faʻateleina o le pH i le taimi o le teuina. O le pH o faʻataʻitaʻiga na togafitia i le enzyme na tumau i le va o le 4.05 ma le 4.31 i le taimi atoa o le teuina, ae o le pH o le sua o le apu e leʻi togafitia na i le va o le 4.12 ma le 4.33.
O le aofa'i o le acidity (TA) o fa'ata'ita'iga e le'i togafitia ma fa'ata'ita'iga e le'i togafitia i le laccase ua fa'aalia ai se aga fa'aitiitia i le fa'ateleina o le taimi e teuina ai (Laulau 1). O le fa'aitiitia o le acidity na mafua mai i le liua o organic acids i carbohydrates po'o fa'agasologa o le enzymatic, fa'apea fo'i ma le oxidation i le taimi o le teuina o le sua.⁶⁴O le aofa'i atoa o le acidity o le sua o le apu fa'atonutonu ma fa'ata'ita'iga na togafitia i le enzyme e maulalo ifo nai lo isi sua (sua o le sitiroperi 0.9%, sua o le pulumu 2.2%, sua o le kumquat 1.0%, sua o le aperikota 2.4%, sua o le moli 0.8%), ae tutusa ma isi sua (e pei o le sua o le pea 0.3%).⁶²O nei eseesega i le sua o le apu fou e le'i togafitia e ono mafua mai i le tele o mea e pei o tulaga o le tuputupu a'e, mea tau kenera, tulaga o le matua, ma auala e fa'agasolo ai.⁶⁵O le faʻaitiitia o le aofaʻi o le acidity o le sua o le apu e togafitia i le vaega pulea ma le sua o le apu e togafitia i le laccase e ogatusa ma iʻuga na tuʻuina atu e Singh et al.⁶⁶e uiga i le faʻaitiitia o le aofaʻi o le acidity o le sua apu a Jin Nuo ina ua mavae aso e 74 o le teuina. I le isi itu, o Oshmiansky ma Wojdylo⁶⁷e le'i maua ni suiga taua i le oona o le sua o le apu pe a su'esu'eina le a'afiaga o metotia fa'amalamalama masani.
O faʻaiʻuga o loʻo tuʻuina atu i le Laulau 1 o loʻo faʻaalia ai o le aofaʻi o mea faʻasusu (TSS) o le sua o le apu na togafitia i le laccase e maualuga atu nai lo le faʻataʻitaʻiga e leʻi togafitia. O nei faʻaiʻuga e ogatasi ma suʻesuʻega na lolomiina.^.68E le gata i lea, o loʻo faʻaalia i le Laulau 1 o le tau o le TSS o le vaega o le sua apu faʻatonutonu sa 9.58 i le taimi muamua ma na oʻo atu i le 11.05 i le faʻaiʻuga o le vaitaimi teuina. O nei tau e maualalo ifo nai lo tau o le TSS o le sua apu fou na lipotia mai e Hamid et al.^.69(11.2 ma le 11.80, i le faasologa). O le tau o le TSS o faʻataʻitaʻiga o le sua apu na togafitia i le laccase na matua faʻateleina, e amata mai le 11.23 ma oʻo atu i le 12.93 ina ua mavae vaiaso e lua o le teuina i le 4°C (Laulau 1). O se faʻaopoopoga tutusa i le TSS i le taimi o le teuina na matauina foi i fualaʻau citrus, tipolo, ma moli suamalie. O le faʻateleina o le aofaʻi o mea mama e mafai ona sosolo (TSS) i le taimi o le teuina atonu e mafua mai i le hydrolysis o polysaccharides (starch) i monosaccharides (suka), le faʻateleina o le malosi ona o le mago o le sua, ma le faʻaleagaina o le pectin i le sua i mea mama e mafai ona sosolo. O le faʻateleina o le aofaʻi o mea mama e mafai ona sosolo (TSS) e foliga mai e mafua mai i le faʻateleina o suka e mafai ona sosolo, lea e ono fausia e ala i le liua o le pectin poʻo le cellulose i suka e mafai ona sosolo e le pectin poʻo le cellulase, i le faasologa, poʻo le hydrolysis o le starch i suka, e pei ona lipotia mai e Hamed et al.^69.E mafai ona matauina le aafiaga o le laccase i meatotino o le sua o le apu, auā o le sua o le apu ua togafitia i le laccase e sili atu ona lelei le tafe ma maualalo le viscosity nai lo le sua e leʻi togafitia. O lenei matauga o loʻo faʻamaumauina i le Laulau 1; O le viscosity o le faʻataʻitaʻiga ua togafitia i le enzyme e 1.87 cP, ae o le viscosity o le faʻataʻitaʻiga faʻatonutonu e 2.95 cP. O lenei faʻaitiitia tele o le viscosity e foliga mai ona o le maualuga o le gafatia e taofi ai le vai o mea e pei o le pectin ma le fausiaina o se fausaga fesoʻotaʻiga fesoʻotaʻi.
I lenei suʻesuʻega, na suʻesuʻeina ai le aafiaga o le laccase i le browning index (BI) o le sua apu e ala i le fuaina o le absorbance i le 420 nm e faʻaaoga ai se spectrophotometer. O loʻo faʻaalia iʻuga i le Laulau 1. I le taimi o le teuina, o le BI o faʻataʻitaʻiga o le sua apu i vaega uma e lua na togafitia ma le le togafitia na faʻaalia ai se aga faʻasolosolo malie o le faʻateleina. O le BI e atagia ai le tulaga o le enaena ma e mafai ona avea o se^{se mea taua}fa'ailoga o tali enaena fa'aenzymatic ma tali e le fa'aenzymatic. Na fa'ateleina tele le mitiia i le taimi o le teuina (P < 0.05). I le fa'ai'uga o le teuina, o le_A420o le taua o faʻataʻitaʻiga o le sua o le apu i le vaega faʻatonutonu ma vaega na togafitia i le enzyme na faʻateleina i le tusa ma le 217% ma le 121%, i le faasologa (Laulau 1). O faʻaiʻuga e faʻaalia ai e mafai e le togafitiga o le enzyme ona faʻaitiitia lelei le tulaga o le enaena i le tusa ma le 56%. O faʻaiʻuga a Bezerra et al.^[19]] e ogatasi ma a matou taunuuga; Na latou faʻaaogaina le laccase-glutaraldehyde-coconut fiber e faʻamalamalama ai le sua o le apu, ma faʻaitiitia ai lona lanu muamua i le 61%.
E ui o polyphenols i sua o fualaau aina e iai ni aafiaga lelei i meaʻai ma togafitiga i le tino o le tagata, ae e mafai foi ona latou tali atu ma porotini, ma mafua ai ona puaoa le sua, faʻaputu, poʻo le pala, ma suia ai le tofo ma le manogi o le oloa ma faʻaitiitia ai lona umi e teu ai.⁷¹O le fa'amoemoega o lenei su'esu'ega o le fa'aitiitia saogalemu lea o le aofa'i o le phenolic compound o le sua o le apu e fa'aaoga ai le laccase mai le Pleurotus ostreatus NRC 620. O taunu'uga o lo'o tu'uina atu i le Laulau 1 o lo'o fa'aalia ai o le aofa'i atoa o le phenolic compound o le sua o le apu na togafitia i le laccase na matua fa'aitiitia lava a'o le'i teuina i le 4 °C. E le gata i lea, o le aofa'i atoa o le phenolic compound na fa'aitiitia fo'i i le taimi o le teuina i fa'ata'ita'iga uma e lua na su'esu'eina (Laulau 1). Su'esu'ega a Sandri ma isi.⁷²ua faaalia ai e mafai e le sua o le apu ua togafitia i le enzyme ona faatumauina lona malosi e tetee atu i le antioxidant ma le aofaʻi o le phenolic compound. Peitaʻi, o taunuuga o se suʻesuʻega a Lettera et al.⁷³ua faʻaalia ai o le togafitia o le sua moli i le fungal laccase e mafai ona faʻaitiitia ai le aofaʻi o phenolic compounds i totonu e oʻo atu i le 45%.
Ua faʻaalia o loʻo i ai i vailaʻau phenolic ni meatotino e pei o le faʻamamaina o radical saoloto, faʻaitiitia ma le faʻamalieina o le okesene singlet, fesiitaiga o atomu haitorosene, ma le foaʻi atu o eletise i radical saoloto, ma avea ai ma antioxidants malolosi.⁷⁴O le mea lea, i lenei suʻesuʻega, na faʻaaogaina ai metotia faʻavae i luga o le DPPH ma le FRAP e iloilo ai le aʻafiaga o le laccase i le gaioiga faʻaantioxidant o le sua o le apu na teuina i totonu o se pusaaisa mo le 14 aso (Table 2). O metotia uma e lua na faʻaalia ai le faʻateleina o le gaioiga faʻaantioxidant i le taimi o le teuina, lea e ono mafua mai i le faʻateleina o vailaʻau phenolic saoloto poʻo le fausiaina o oloa o le Maillard reaction (MRPs), faʻatasi ai ma oloa o le Maillard reaction atonu o le mafuaʻaga lea o le faʻateleina o le gaioiga faʻaantioxidant.⁷⁵O tali enaena e lē fa'aaogāina ai le enaena (e aofia ai le fa'aleagaina o le ascorbic acid, tali mai o le Maillard, ma le fa'aleagaina o suka e ala i le acid) e maua ai lanu enaena (melanoidins). O oloa fa'aleagaina o le ascorbic acid ma oloa fa'aleagaina o le suka (e pei o carbonyl compounds) e mafai ona tali atu ma amino acids e ala i tali mai o le Maillard.⁷⁶E ui ina ua maeʻa suʻesuʻeina ma le loloto le faʻalanuina o fualaau ʻaina ma fualaau faisua i le taimi o le teuina, ae o lo tatou malamalama i nei tali atu e tumau pea le faʻatapulaʻaina.⁷⁷Pe a faatusatusa i le metotia FRAP, o le sua apu na togafitia i le laccase na faaalia ai le maualalo tele o le gaioiga o le antioxidant e ala i le metotia DPPH (Table 2), ma o le gaioiga o le antioxidant o faataitaiga uma na faateleina tele i le faateleina o le taimi e teuina ai. E lua auala eseese mo le fuafuaina o le gaioiga o le antioxidant na faaaogaina i lenei suesuega ona e eseese o latou mataupu faavae. O le metotia DPPH e fuaina ai le gafatia e faaleaogaina ai radicals saoloto, ae o le metotia FRAP e fuaina ai le gafatia e faaitiitia ai ions uʻamea. O le mea lea, e fautuaina e faaaoga le tele o metotia mo le fuafuaina o le gaioiga o le antioxidant ina ia malamalama atili ai i le gaioiga o le antioxidant o faataitaiga na suesueina.⁷⁸
O se tasi o fa'ai'uga autū o lenei su'esu'ega o le *Pleurotus ostreatus* laccase NRC 620 e fa'aalia ai le gaioiga sili ona lelei i le 70°C ma le pH 3.0. Pe a fa'atusatusa i isi fungal laccases e masani ona fa'aaogaina mo le fa'amaninoina o le sua, e pei o le *Trametes versicolor* ma le *Ganoderma lucidum* laccases, o le *P. ostreatus* NRC 620 e fa'aalia ai le maualuga o le mautu o le vevela ma le pH e sili atu ona 'a'asa. O Laccases mai le *Trametes versicolor* ma le *Ganoderma lucidum* e masani ona fa'aalia ai le gaioiga sili ona lelei i le va o le 50-60°C ma i le pH i le va o le 3.5 ma le 5.0. O lenei eseesega e ono fesoasoani i le fa'aleleia atili o le lelei o le fa'amaninoina o le sua, aemaise lava mo sua 'a'asa lea e taua tele ai le mautu i le pH maualalo. O le uiga tulaga ese o le *P. Pe a fa'atusatusa i isi fungal laccases na su'esu'eina, o le *Pleurotus ostreatus* NRC 620 e fa'aalia ai le gafatia e galue lelei i lalo o tulaga faigata. O lona vevela sili ona lelei o gaioiga e faʻaalia ai ni faʻamanuiaga e ono maua i galuega faʻapisinisi, e pei o le vave o le saoasaoa o le tali atu ma le faʻaitiitia o le faʻaleagaina o siama. O lona pH maualalo, lea e fetaui lelei ma le natura oona o le tele o sua, atonu e aoga i faiga faʻamamāina o sua. O nei taunuuga e faʻamaonia ai le suʻesuʻeina atili mo le faʻaaogaina tele, ma avea ai le *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ma se isi auala e mafai ona sui ai punaoa masani o fungal laccase. Pe a faʻatusatusa i suʻesuʻega na faia muamua, na matou iloa ai o le vevela sili ona lelei o le 60°C ma le pH sili ona lelei o le 3.0. Ina ua maeʻa le tali atu i le 60°C mo le 80 minute, na taofia ai le *Ganoderma lucidum* laccase.⁴⁶% o ana gaoioiga.79 E tusa ai ma Kurniawati ma Nicelle⁸⁰, o enzymes *Ganoderma lucidum* e faaalia ai le mautu lelei i le feololo i le 25°C ma le pH e amata mai le 5.0 i le 8.0, ma le mautu i le pH 6.0 ma le vevela e amata mai le 10 i le 30°C. I lenei suʻesuʻega, na matou iloa ai o le pH ma le vevela sili ona lelei mo le gaioiga o le enzyme mo le *Pleurotus ostreatus* e 3.0 ma le 70°C, i le faasologa. Ina ua maeʻa ona faʻasusu i le 40°C ma le 50°C mo le lua itula, na taofia e le enzyme le 68.33% ma le 59.61% o lana gaioiga, i le faasologa. E le gata i lea, o le Pleurotus ostreatus NRC 620 laccase na faaalia ai le gaioiga maualuga i luga o le lautele o le vevela mai le 50°C i le 80°C, toetoe lava a oʻo atu i le gaioiga maualuga (69%–98%), faatasi ai ma le gaioiga maualuga na matauina i le 70°C.
I le faaiuga, o le oyster mushroom laccase NRC620, na maua i lalo o tulaga tumau, na faaalia ai le gaioiga sili ona lelei ma le mautu i le tele o tulaga o le pH ma le vevela, ma faaalia ai le mautu sili atu pe a faatusatusa i isi punaoa o le enzyme. O le faaopoopoina o le 10 mM MgSO₄ ma le CuSO₄ na faateleina ai le gaioiga o le enzyme e tusa ma le 21% ma le 35%, i le faasologa. Ina ua faagasoloina i le sua o le apu, na faaitiitia ai e le enzyme le pH ma le viscosity, ae na o sina faaitiitia o le phenolic content i le taimi o le teuina.
O nei taunuuga ua faamaonia ai le gafatia o le laccase i le alamanuia o meaai, aemaise lava i le faamaninoina o meainu. I le vaevaeina faapitoa o phenolic compounds, e le gata ina faaitiitia ai e le laccase le turbidity ma faaleleia atili ai le manino ae faatumauina ai foi le lelei o sua o fualaau aina i lalo o tulaga faigofie o le faagaoioiga. E le pei o vailaau faamanino masani e pei o le gelatin, bentonite, ma le silica gel, e le gaosia e le laccase ni otaota pe aveese ai ni manogi manaia mai meainu, ma avea ai ma se filifiliga e sili atu ona lelei mo le siosiomaga ma gafataulimaina. E le gata i lea, pe a faatusatusa i isi enzymes ma metotia faamama, e ofoina atu e le laccase se fofo faapitoa ma taugofie e aunoa ma le faaleagaina o le lelei o oloa.
Kyomuhimbo, HD ma Brink, HG. Fa'aoga ma fuafuaga fa'agaoioia o laccases o lo'o i ai le kopa; o se iloiloga. Heliyon 9, e13156 (2023).